Luxury Автодом — Marchi Mobile eleMMent Р.В.

Роскошный дом на колесах — Marchi Mobile eleMMent RV — специальный автомобиль, роскошный и полностью абсурдны, невероятно с большим плоским на колесах, расширенной террасой и футуристической кабине водителя. Зачем нам нужны гостиницы, если у нас есть дома роскошные моторные? В конце концов, просто посмотрите, это походит на 12 м в длину дворец на колесах. Единственная загвоздка в том , что он стоит «всего» два миллиона евро … WTF?!

Караван приходит от австрийской компании Marchi Mobile, с особым именем eleMMent. Это специальный автомобиль, роскошный и полностью абсурдны, невероятно. Зачем? Во-первых, давайте упомянуть терраса на крыше, который измеряет 65 м2. С подогревом и бар. Но это только начало, потому что это животное 20 тонн alsoshows покинуть большая спальня с 40 «телевизор, красивая ванная комната с тропическим душем. Даже кабина имеет двухъярусную кровать.

Футуристическая кабина водителя
Красивая ванная комната
Тропический душ
Красивая спальня
Высокое качество кровать королевского размера

Впечатляет? Определенно да, потому что идеальный дом на колесах оснащен «Sky Lounge», терраса на крыше , которая открывается при нажатии кнопки. Но как насчет дополнительных добавок? Хорошо, таким образом, например, мобильный Интернет, рабочий камин, потоковое видеонаблюдение, спутниковое телевидение и светоотражающие волокна светящихся в темноте , чтобы улучшить безопасность в ночное время , показывая все остальные на дороге , насколько велика ваша машина.

Термоусадочные крышка открывает террасу на крыше со столом и диваном. Идеальное место для отдыха после дня на дороге, а также для комфортного перекур. И если говорить о Marchi Mobile, то 510bhp двигатель eleMMent достигает максимальной скорости 150 KMH. Так чего же вы ждете? Эти роскошные караваны строго ограниченным тиражом, на самом деле, Марчи Mobile, вероятно, производит только около пяти штук в год.

Характеристики продукта:
Самый дорогой и экстравагантный мобильный дом на рынке
Увеличенный 65 м2 терраса с убирающейся лестницей
Полный встроенный бар
Огромные окна небо
Основная спальня с ванной комнатой
Полностью функциональный камин
Светящиеся отражающие волокна на внешней стороне транспортного средства при движении в темное время суток
2x 40 «HD TV
Сенсорный центр управления
Автоматическое полы с подогревом
затемнение окон
Полностью настраиваемый интерьер
Вращающиеся стулья
подключение Wi-Fi
Мини-кухня
Регулируемое освещение, кондиционирование воздуха и отопление
Расширяемые стороны автомобиля создают массивный 130 м2 жилой площади
Дождевой душ
Красиво обставлены итальянской и австрийской дизайн

Технические характеристики:
510bhp дизельный двигатель
Расход: 12 л / 100 км
Максимальная скорость 150 KMH
Карбоновый задний диффузор с спортивной двойной выхлопной
Аэродинамическая конструкция позволяет сэкономить до 20% расходов на топливо
Вес 20 тонн
Длина 12 м
Облицовка автомобиля изготовлен из стекловолокна
Шасси имеет DAF XF105

самый дорогой дом на колёсах

Авто и Мото, Самые-самые

Оставить комментарий

Путешествие на личном автомобиле может стать незабываемым приключением, однако легковые машины не всегда могут гарантировать абсолютный комфорт передвижения и досуга. Идеальным вариантом для кемпинга являются дома на колёсах, оборудованные жилым помещением и всеми благами цивилизации вроде полноценной кухни, санузла, отопления и т. п. Некоторые производители предлагают покупателям настоящие особняки на колёсах, например, EleMMent Palazzo Superior от Marchi Mobile признан самым дорогим представителем своего класса. При подготовке к дальнему путешествию на своём авто следует убедиться в исправности всех систем транспортного средства. Не забудьте и про аккумулятор: если его работоспособность вызывает сомнения, лучше приобрести ему замену. Купить аккумуляторы вы можете на сайте магазина A-mega-auto a-mega-auto.com/akkumulyatory/.

EleMMent Palazzo

Кемпинг-индустрия предлагает покупателям самые разнообразные варианты домов на колёсах практически на любой кошелёк. Впрочем, едва ли кто-то мог подумать, что подобные транспортные средства способны конкурировать по роскоши и расточительству с лимузинами, яхтами и личными самолётами. Несколько лет назад австрийская компания Marchi Mobile представила миру модель кемпера EleMMent Palazzo, которая вывела глэмпинг на совершенно невообразимый уровень где-то за пределами стратосферы. Palazzo переводится с итальянского языка как «дворец», что идеально описывает саму суть этого дома на колёсах. По словам представителей компании, конструкторы получили задачу разработать высококлассный кемпер, не перегружая его экстерьер и интерьер элементами показной роскоши.

За основу EleMMent Palazzo в Marchi Mobile приняли один из концепт-каров Mercedes, который использовали для отработки дизайна кузова с минимальным аэродинамическим сопротивлением. В качестве силовой установки автодома выступает 6-цилиндровый рядный двигатель Volvo мощностью до 600 л. с. Согласно собственным тестам компании, индекс лобового сопротивления этой дорожной яхты составляет лишь 0,3615. Благодаря обтекаемому кузову, выполненному из углеволокна, особняк на колёсах способен разгоняться до 150 км/ч, несмотря на внушительный размер (12-13,7 м в длину и 2,55 м в ширину в сложенном виде / 3,8 м в разложенном) и массу (от 26 тонн). При этом площадь жилых помещений в базовой версии составляет 33 м², а в версии Superior – 68 м². По словам представителей Marchi Mobile, передвижной дворец расходует примерно на 20-25% меньше топлива, чем серийные транспортные средства аналогичного класса и массы.

Экстерьер

К разработке дизайна экстерьера руку приложил известный промышленный дизайнер Луиджи Колани. В EleMMent Palazzo хорошо узнаётся фирменный стиль Колани – плавные округлые линии, богатое остекление и безумного вида «купол» вместо лобового стекла. По задумке Луиджи, который постарался объединить в автодоме миры автоспорта, авиации и мореплавания, сооружение на втором этаже автомобиля с трёхсекционным панорамным лобовым стеклом должно имитировать кабину вертолёта и предоставлять водителю отменный обзор. Замок на колёсах также оборудован электрической раздвижной дверью, а в топовой версии EleMMent Palazzo Superior имеется ещё и выдвижная терраса с телескопическим навесом.

Интерьер и удобства

Безусловно, важнейшей составляющей дома на колёсах является его внутреннее обустройство. EleMMent Palazzo имеет просторную гостиную / столовую, кухню, санузел и спа-зону, а также роскошную спальню с двуспальной кроватью и гардеробной. В гостиной располагаются два дивана, обеденный стол и бар, а кухня оборудована полноценным холодильником с морозильной камерой, плитой с вытяжкой и раковиной с электронным управлением подачей воды.

В кемпере Marchi Mobile можно с комфортом принять тропический душ и воспользоваться туалетом с гигиенической системой, а затем привести себя в порядок перед зеркалом над туалетным столиком. Более того, владельцы этого чуда на колёсах могут на ходу освежить свой гардероб при помощи бортовой стиральной машины и сушилки. Электроснабжение дорожной яхты осуществляет независимый генератор жилой зоны. Дом на колёсах оборудован несколькими объёмными баками для пресной воды, сточных вод и канализации.

Все эти удобства располагаются на двух этажах. На борту EleMMent Palazzo также имеется беспроводной интернет, высококлассная аудиосистема, спутниковое телевидение, умная система освещения и несколько LED-дисплеев. Для оформления интерьера Marchi Mobile использует эксклюзивные виды древесины и камня, однако по желанию заказчика дизайнеры могут добавить роскоши при помощи драгоценных металлов и камней.

Стоимость EleMMent Palazzo

Marchi Mobile производит различные версии EleMMent Palazzo, адаптируя комплектацию и дизайн интерьера под требования своих клиентов. Стоимость базовой комплектации стартует от 1,9 миллиона долларов. Согласно некоторым источникам, Marchi Mobile продаёт около 10 люксовых кемперов в год. Самую дорогую версию дома на колёсах в кузове Superior приобрёл бизнесмен из Дубая: владелец обширных участков газоносных полей заплатил за автомобиль порядка 3 миллионов долларов.

Источник фото: Marchi Mobile

Поделиться в соцсетях

EleMMent PalazzoMarchi Mobile

Найти:

Полезные советы, обзоры, новости и много чего еще)

Мобильные элементы — Последние исследования и новости

• Atom
• RSS-канал

Мобильные элементы — это последовательности ДНК, которые могут перемещаться по геному, изменяя количество своих копий или просто меняя свое местоположение, часто влияя на активность близлежащих генов. Они включают мобильные элементы ДНК, плазмиды и элементы бактериофагов. Совокупность всех мобильных генетических элементов в геноме можно назвать мобильом.

Последние исследования и обзоры

• Исследовать

  09 декабря 2022 г.

  |
  Открытый доступ

  • Кохей Нагао
  • , Томоко Оцузуми
  •  и Юдзи Гото

  Научные отчеты 12, 21373

• Исследовать

  03 декабря 2022 г.

  |
  Открытый доступ

  Ретротранспозоны представляют собой мобильные генетические элементы, обычно подавляемые метилированием ДНК в дифференцированных клетках. Здесь авторы показывают, что гипометилирование ДНК в плюрипотентных стволовых клетках, индуцированных мышами, позволяет ретротранспозонам прыгать, но это может быть заблокировано ингибитором обратной транскриптазы.

  • Патрисия Гердес
  • , Сью Мей Лим
  • и Джеффри Дж. Фолкнер

  Nature Communications 13, 7470

• Исследовать

  27 ноября 2022 г.

  |
  Открытый доступ

  • Андреа Лакони
  • , Роберта Толоси
  •  и Алессандра Пиччирилло

  Научные отчеты 12, 20413

• Исследовать

  19 ноября 2022 г.

  |
  Открытый доступ

  Здесь авторы показывают, что перестройки, опосредованные мобильными элементами, затрагивают более 500  т. п.н. среднего человеческого генома, являются источником индивидуальной изменчивости, субстратом для эволюционных изменений и могут происходить с помощью различных механизмов.

  • Парити Балачандран
  • , Иша А. Валавалкар
  • и Кристин Р. Бек

  Nature Communications 13, 7115

• Исследовать

  14 ноября 2022 г.

  |
  Открытый доступ

  Как субгеномная дивергентная и -конвергентная транскрипция опосредуется и гармонизируется в гексаплоидном геноме мягкой пшеницы, остается неясным. Здесь, путем характеристики карт цистромы, авторы показывают, что элементы транспозонов со способностью связывать фактор транскрипции могут внести свой вклад.

  • Ююн Чжан
  • , Цзыцзюань Ли
  • и Ицзин Чжан

  Nature Communications 13, 6940

Все исследования и обзоры

Новости и комментарии

• Основные результаты исследований

  |
  14 ноября 2022 г.

  В новом исследовании Science сообщается о рефакторинге генетических кодов в Escherichia coli для создания двунаправленного «генетического брандмауэра», который предотвращает передачу генетического материала от синтетических организмов или к ним.

  • Кирсти Минтон

  Nature Reviews Genetics 24, 1

• Основные результаты исследований

  |
  31 марта 2022 г.

  В этой статье Journal Club Джефф Фолкнер обсуждает, как новаторское исследование мобильности LINE-1 в геномах человека продемонстрировало не только роль в заболевании, но и молекулярные детали механизмов ретротранспозиции.

  • Джеффри Дж. Фолкнер

  Nature Reviews Genetics 23, 458-459

• Основные результаты исследований

  |
  18 ноября 2021 г.

  Исследование, проведенное в Nature Communications , показывает, что горизонтальный перенос бактериальных хромосом посредством фаг-опосредованной латеральной трансдукции делает их более мобильными, чем многие классически определенные мобильные генетические элементы, включая плазмиды и транспозоны.

  • org/Person»> Дороти Клайд

  Природа Обзоры Генетика 23, 3

• Основные результаты исследований

  |
  25 октября 2021 г.

  Два недавних исследования показали, что предполагаемые нуклеазы, кодируемые транспозонами семейства IS200/IS605, являются программируемыми РНК-управляемыми ДНК-эндонуклеазами, которые могут представлять собой новый источник ферментов, редактирующих геном, для биотехнологических приложений.

  • Грант Отто

  Nature Reviews Genetics 22, 747

• Основные результаты исследований

  |
  31 августа 2020 г.

  • Джун Лю

  Природные растения 6, 1073

• Основные результаты исследований

  |
  29 ноября 2019 г.

  В двух статьях журнала Nature Plants приводятся доказательства того, что растения, как и млекопитающие, регулируют экспрессию генов из дальнодействующих цис--регуляторных элементов (CRE). Растительные CRE широко распространены и имеют отчетливые эволюционно консервативные характеристики хроматина, которые предсказывают их влияние на экспрессию генов.

  • org/Person»> Дороти Клайд

  Nature Reviews Genetics 21, 68-69

Все новости и комментарии

SXT/R391 Интегративные и конъюгативные элементы (ICE) кодируют новую стратегию «ловушки» для побега подвижных элементов опосредуют и кодируют все детерминанты для их собственной интеграции, вырезания и переноса из одного генома хозяина в другой с помощью механизма сайт-специфичной рекомбинации, самоциркуляции и конъюгативного переноса (Taviani et al., 2009).; Майкл и др., 2012). В целом элементы имеют мозаичную структуру, содержащую фагоподобные системы интеграции, плазмидоподобные системы переноса и поддержания, а также накопленные дополнительные гены с гомологией для различных организмов, что предполагает эволюционное накопление посредством пассажа и пребывания в различных организмах-хозяевах (Boltner et al. , 2002; Пемброк и др.

, 2002). Они являются основным фактором эволюции бактериальных геномов, позволяя бактериям быстро приобретать новые фенотипические признаки и адаптивные функции, такие как устойчивость к противомикробным соединениям и тяжелым металлам, механизмы вирулентности, метаболические пути (такие как пути разложения ксенобиотических загрязнителей) и способность противостоять заражению бактериофагами (Ryan et al., 2009; Возняк и Уолдор, 2010 г.; Гульельмини и др., 2011; Ван Хоудт и др., 2012). Сообщается о растущем числе ICE, многие из которых связаны с множественной лекарственной устойчивостью и адаптивными чертами и заархивированы в базе данных ICE Berg Database ¹ (Bi et al., 2012).

Основной набор генов, необходимых для функционально активного ДВС, разделен на три отдельных модуля, известных как модули поддержания, конъюгации и регуляции (Wozniak and Waldor, 2009). Модуль обслуживания содержит гены, ответственные за стабильную интеграцию ICE в геном хозяина, и определяется наличием двух генов int и xis (Storrs et al. , 1991). Интеграза ICE ( int ) представляет собой рекомбиназу, которая катализирует реакцию рекомбинации между специфическими сайтами узнавания в геноме хозяина (attB) и кольцевым элементом ICE, обычно называемым attP (расположенным на ICE; McGrath and Pembroke, 2004). В дополнение к интегразе большинство ICEs кодируют фактор направленности рекомбинации (RDF), называемый Xis, который стимулирует вырезание элементов ICE для переноса (Lewis and Hatfull, 2001; Abbani et al., 2005; O’Halloran et al., 2007; Wozniak and Уолдор, 2010). ICE передаются через модуль конъюгации и используют механизмы конъюгации, которые очень похожи на механизмы конъюгативных плазмид. Грамотрицательные ИПФ обычно используют системы секреции IV типа для конъюгативного переноса (Burrus and Waldor, 2004; Wozniak and Waldor, 2010; Guglielmini et al., 2011; Bellanger et al., 2014). Элементы ICE обычно содержат регуляторный модуль для контроля различных аспектов метаболизма ICE. ЛЕД 9Было обнаружено, что 0118 St 1 и семейство SXT/R391 имеют регуляторные системы, содержащие «фагоподобные» регуляторные гены, которые индуцируются агентами, повреждающими ДНК (Beaber and Waldor, 2004; O’Halloran et al. , 2007; Bellanger et al. др., 2008).

Семейство ICE SXT/R391

Семейство ICE SXT/R391 является одним из крупнейших семейств ICE, в котором на сегодняшний день экспериментально или биоинформационно идентифицировано более 100 элементов из этой группы (Bi et al., 2012). Эта группа была первоначально признана после секвенирования R39.1 (Болтнер и др., 2002). С тех пор было идентифицировано большое количество элементов SXT/R391 на основе сходной мозаичной структуры, в то время как более ранние элементы, относящиеся к 1970-м годам, такие как R997 и pMERPH, также были членами этой группы (McGrath et al., 2006). ИПФ семейства SXT/R391 были идентифицированы как в клинических (человеческих и ветеринарных), так и в экологических изолятах гаммапротеобактерий в основном (Burrus and Waldor, 2004; Wozniak et al., 2009), что важно как сайт интеграции attB в пределах 9Ген 0118 prf C (участок длиной 17 п.н. на 5′-конце гена; Hochhut, Waldor, 1999; McGrath, Pembroke, 2004; Wozniak, Waldor, 2010) высоко консервативен в этой группе бактерий (Armshaw, Pembroke, 2013c). ).

С начала 1990-х годов было обнаружено, что ICE SXT/R391 широко распространены как в экологических, так и в клинических изолятах Vibrio cholerae из Азии и Африки (Burrus and Waldor, 2004; Spagnoletti et al., 2014). ICE SXT/R391 были обнаружены во всех изолятах, выделенных от больных холерой на Гаити (Ceccarelli et al., 2013), и естественным образом встречаются у многих других энтеробактерий (Juiz-Rio et al., 2005; Pembroke and Piterina, 2006).

ICE SXT (99 т.п.н.) является одним из двух архетипических членов семейства SXT/R391, который первоначально был выделен из клинического изолята V. cholerae O139 с множественной лекарственной устойчивостью в Индии в 1992 г. (Beaber et al., 2002b) . Вторым архетипическим членом семейства SXT/R391 является ICE R391 (89 kb), впервые обнаруженный в 1967 г. в изоляте Providencia rettgeri из Южной Африки (Boltner et al., 2002).

Все элементы содержат консервативный основной набор генов (49генов-29 известных функций и 20 гипотетических генов, см. рисунок 1) и последовательности, которые облегчают регуляцию функций элементов, их интеграцию/вырезание и их конъюгативный перенос (Wozniak et al., 2009). Исследования Beaber et al. (2002a), Возняк и др. (2009) и Lei et al. (2016) предположили, что члены семейства SXT/R391 содержат пять «горячих точек» и пять вариабельных областей, в которые дополнительные (неосновные) гены интегрируются в определенных местах основного генома. Эти гены кодируют белки, участвующие в устойчивости к антибиотикам и тяжелым металлам, системы модификации рестрикции, системы репарации ДНК и многие другие функции.

РИСУНОК 1. Молекулярная карта ICE R391, показывающая расположение генов, связанных с элементом размером 89 т.п.н. (Boltner et al., 2002; Armshaw and Pembroke, 2013c). orf 4, кодирующий эксцизионазу Jef/xis (O’Halloran et al., 2007), расположен на левом конце элемента в интегрированной форме. Orf 43, обозначенный здесь как tra V, расположен в центре элемента внутри кластера генов переноса ICE (Armshaw and Pembroke, 2013a,b, 2015). Под ядром ICE показаны гены, общие для всех элементов ICE (Wozniak et al., 2009).).

SOS-ответ, относящийся к семейству ICE SXT/R391

SOS-ответ — это глобальный ответ на повреждение ДНК, при котором клеточный цикл останавливается, а репарация ДНК и мутагенез индуцируются. В системе участвует белок RecA (Michel, 2005). В 2004 г. было обнаружено, что репрессия setC и setD в ICE SXT ( orf 90 и 91 в ICE R391), гомологичных транскрипционным энхансерам, приводит к индукции SOS-ответа, который способствует аутопротеолизу SetR. ( Orf 96) (Beaber et al., 2004). SetR / Orf 96 кодирует cI-подобный белок-репрессор, гомологичный cI-репрессору фага λ ⁴³⁴ . (Boltner et al., 2002) Было обнаружено, что это, в свою очередь, усиливает передачу элемента ICE SXT. Пулен-Лапрад и др. (2015) продемонстрировали, что экспрессия генов, связанных с конъюгативной функцией семейства SXT/R391 ICE, строго регулируется с помощью SetR/Orf96 . Это подавляет экспрессию генов энхансеров транскрипции setC/orf90 и setD/orf91 . Продукты этих генов активируют транскрипцию ICE, кодируемых int , jef ( xis ), и связанных с конъюгацией оперонов (O’Halloran et al., 2007; Poulin-Laprade et al., 2015).

Изучение УФ-сенсибилизации семейства SXT/R391

Было показано, что члены семейства ICE SXT/R391 вызывают необычную функцию УФ-индуцируемой сенсибилизации после повреждения ДНК (Pembroke and Stevens, 1984; МакГрат и др., 2006). В начале 1980-х годов было отмечено, что присутствие R391 и R997 сенсибилизирует штамм Escherichia coli AB1157 к УФ-облучению, значительно снижая выживаемость клеток после облучения. Считалось, что этот эффект сенсибилизации, скорее всего, был связан с вмешательством в один из RecA ^∗ -индуцированных путей репарации повреждений ДНК E. coli , поскольку было показано, что эффект является recA -зависимым, но lexA — независимые (Пембрук и Стивенс, 19 лет)84). Механизм не мог быть выяснен в то время, и не было предложено никакого обоснования того, почему элемент R391 (ICE R391) должен оказывать такое влияние на клетки-хозяева.

Анализ природы УФ-сенсибилизации, связанной с ICE R391, затем был снова исследован с использованием библиотеки структурированных делеций всего ICE (Armshaw and Pembroke, 2013a,b). Оказалось, что делеция ICE кодирует orf 90 и 91 (энхансеры транскрипции R391) и ген конъюгативного переноса orf 9.0119 43 (кодирующий гомолог Tra V) устранял индуцированную сенсибилизацию. Это было интересно, поскольку было обнаружено, что или 43 являются одними из наиболее консервативных «основных генов» семейства SXT/R391, при этом все гомологи (найденные на сегодняшний день) имеют сходство на ≥98%, что указывает на то, что он может находиться в процессе эволюции. давление, чтобы остаться сохраненным. Orf 43 является гомологом TraV, который образует часть поры спаривания во время конъюгации (Alvarez-Martinez and Christie, 2009). Характеристика экспрессии этого гена показала, что УФ и другие агенты, повреждающие ДНК, индуцируют хозяина 9.0118 Rec Ген, который продукт Who, Rec A ^∗ , расщеплял ICE R391 Repressor ORF 96. Расщепление ORF 96, привели к индукции ORF 90 и 91 (Armshaw и PEM-L; и др., 2015).

Ранее было продемонстрировано, что индукция или 90/91 приводит к усилению экспрессии или 4, который кодирует эксцизионазу ICE R391, Jef (J эксцизионазу). Индукция Jef, которая также известна как Xis (O’Halloran et al., 2007), привела к увеличению числа копий промежуточного соединения с циклическим переносом ICE R39.1 и, следовательно, повышенная скорость конъюгации с клетками-реципиентами (O’Halloran et al., 2007). Это также было показано Poulin-Laprade et al. (2015).

Затем было интересно выяснить, была ли эта иерархия экспрессии, которая привела к индукции или 43 (Armshaw and Pembroke, 2013a, 2015), связана с Jef/Xis, и действительно, каков был механизм сенсибилизации в результате orf 43 индукционный.

Клонирование и контролируемая экспрессия или 43 изначально использовались для изучения природы «ультрафиолетовой сенсибилизации» (Armshaw and Pembroke, 2015). При сверхэкспрессии, как это происходит при УФ-индукции, контролируемой orf90 / 91 наблюдались повышенная проницаемость клеток и лизис клеток (Armshaw and Pembroke, 2015), что согласуется с повышенным образованием пор внутри клетки ICE R391. Трансмиссионная электронная микроскопия (ПЭМ) выявила значительный лизис клеток (Armshaw and Pembroke, 2015), что согласуется с гибелью клеток и сенсибилизацией, наблюдаемой после индукции нативного или 43.

‘

Люк ’ Побег

Хотя значение такого пагубного эффекта не было сразу очевидным, когда два явления (увеличение круглой формы подвижного элемента и разрыв клетки) были связаны, возникла проверяемая гипотеза. С одной стороны, повреждение ДНК вызывает удаление элемента (O’Halloran et al., 2007; Poulin-Laprade et al., 2015), одновременно вызывая лизис клеток. Было высказано предположение, что этот лизис мог позволить0118 «лазейка» эффект, при котором кольцевой промежуточный продукт (вырезанный элемент ICE) может ускользнуть в отсутствие функционального конъюгативного механизма, как это может иметь место в сильно поврежденных клетках. Эта гипотеза была проверена с использованием специфических делеционных мутантов ICE R391, у которых отсутствует конъюгативный перенос (Armshaw and Pembroke, 2013a). Эти штаммы не могли подвергаться конъюгативному переносу на любых обнаруживаемых уровнях. Однако при индукции или 43, как это происходит в клетках с повреждением ДНК, содержащих конъюгативно дефектный ICE R391, было установлено, что низкие уровни обнаруживаемой передачи могут быть восстановлены (Armshaw and Pembroke, 2015). По сути, очевидная УФ-сенсибилизация/повреждение ДНК позволяет сформировать «люк», обеспечивающий выживание ICE при значительном повреждении ДНК клетки-хозяина. Этот механизм может позволить ICEs SXT/R391, у которых отсутствуют необходимые конъюгативные гены (возможные примеры их были идентифицированы Spagnoletti et al. , 2014, однако могут применяться альтернативные объяснения селективной потери функций конъюгации после переноса) для передачи через Механизм «люк» на низких уровнях. Затем элементы поглощаются другими клетками при «кажущейся трансформации» Армшоу и Пемброк (2015); были проведены эксперименты с нокаутом генов. Гены аппарата конъюгации orf 40– orf 44 были выбиты. Были обнаружены скорости передачи <10 ^-10 . Когда к этому нокауту была добавлена ​​экспрессионная плазмида с orf43 , перенос восстанавливался со скоростью 1,54×10 ^-7 (без УФ) и 1,01×10 ^-6 (с УФ). Добавление ДНКазы отменяет перенос (скорость переноса <10 ^-10 ). Это указывало на то, что должна была произойти какая-то форма трансформации.

Этот механизм (рис. 2) мог бы также обеспечить резервный путь выхода, чтобы позволить уровни конъюгации, описанные выше, так что, если клетка была настолько повреждена, что конъюгация не может происходить, то для элемента был бы доступен вторичный механизм выхода. Это, по-видимому, новый механизм выживания подвижных элементов, который мы называем «лазейкой» и который, предположительно, происходит в тандеме с образованием промежуточного продукта кольцевого переноса, который впоследствии высвобождается в результате образования пор и лизиса клеток, превращая элемент доступен для трансформации, что позволяет ДВС выживать в экстремальных условиях. Этот предложенный механизм пока уникален для SXT/R39.1, и до сих пор не было обнаружено сопоставимого механизма ускользания в других мобильных генетических элементах.

РИСУНОК 2. Схема аварийного механизма, предлагаемого для ДВС группы SXT/R391. Повреждение ДНК вызывает расщепление orf 96, что приводит к усилению экспрессии orf 90/91 (Beaber et al., 2004), что, в свою очередь, приводит к индукции orf 4 и продукции эксцизионазы ICE (Jef /Xis), что приводит к повышению уровня циркулярной формы ДВС (O’Halloran et al., 2007). УФ-облучение также приводит к увеличению экспрессии orf 43, что приводит к перепроизводству гомолога ICE Tra V (Armshaw and Pembroke, 2013a,b, 2015), что приводит к увеличению пористости клеток и разрыву клеток, обеспечивая выход или «лазейку» для ICE.

Краткое изложение механизма

1. ДНК бактериальной клетки повреждается (ультрафиолетовым излучением, химическим повреждающим ДНК агентом, таким как митомицин С и т. д.), образуя одноцепочечную ДНК, которая стимулирует переход RecA в активную форму RecA ^∗ (O «Рейли и Кройцер, 2004 г.).

2. RecA ^∗ расщепляет предполагаемый ICE SXT/R391 setCD / orf90-91 репрессорный белок setR/orf96 (Pembroke and Stevens, 1984; 2005).

3. Расщепление предполагаемого белка-репрессора setR/orf96 вызывает повышенную экспрессию предполагаемого комплекса активатора транскрипции, кодируемого setCD / orf90-91 (Beaber et al., 2004).

4. Предполагаемый комплекс активатора транскрипции, кодируемый setCD / orf90-91 связывается с регуляторной областью выше orf 43, повышая экспрессию TraV _R391 ( orf 43) таким образом, что это цитотоксично для клетки-хозяина (Armshaw and Pembroke3b, 2013b, 2018). , 2015; Пулен-Лапрад и др., 2015).

5. Предполагаемый комплекс активатора транскрипции, кодируемый setCD / orf90-91 , также связывается с регуляторной областью выше orf 4, которая кодирует белок Jef, белок, который опосредует вырезание интегрированного SXT/R391 ICE из бактериальной хромосомы (O’Halloran et al., 2007; Poulin-Laprade et al., 2015).

6. Цитотоксический эффект является результатом повреждения наружной мембраны клеток, вызванного действием TraV _R391 , что вызывает образование пор в мембране, через которые происходит выход вырезанного элемента SXT/R391 ICE (‘ trap-door’ ) и гибель клетки (Armshaw, Pembroke, 2013b, 2015) (рис. 2).

7. Затем элемент SXT/R391 ICE становится доступным для использования (через «кажущуюся трансформацию») в другие бактериальные клетки (Armshaw and Pembroke, 2015)

Вклад авторов

Все перечисленные авторы внесли существенный, непосредственный и интеллектуальный вклад в работу и одобрили ее для публикации.

Финансирование

Эта работа финансировалась Ирландским исследовательским советом по науке, технике и технологиям (IRSCET) в штате Пенсильвания.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов. 9 http://db-mml.sjtu.edu.cn/ICEberg/

Ссылки

Аббани, М., Ивахара, М., и Клабб, Р. Т. (2005). Структура белка эксцизионазы (Xis) из конъюгативного транспозона Tn916 дает представление о регуляции гетеробивалентных тирозин-рекомбиназ. Дж. Мол. биол. 347, 11–25. doi: 10.1016/j.jmb.2005.01.019

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Альварес-Мартинес, CE, и Кристи, PJ (2009 г.). Биологическое разнообразие прокариотических систем секреции IV типа. Микробиолог. Мол. биол. Ред. 73, 775–808. doi: 10.1128/MMBR. 00023-09

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Армшоу П. и Пемброк Дж. Т. (2013a). Генерация и анализ библиотеки делеций ICE R391 идентифицируют гены, участвующие в функции сенсибилизации клеток, кодируемой элементом, индуцируемым УФ-излучением. FEMS микробиол. лат. 342, 45–53. doi: 10.1111/1574-6968.12107

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Армшоу П. и Пемброк Дж. Т. (2013b). Контроль экспрессии ICE R391, кодируемой УФ-индуцируемой клеточно-сенсибилизирующей функцией. ВМС микробиол. 13:195. doi: 10.1186/1471-2180-13-195

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Армшоу П. и Пемброк Дж. (2013c). «Интегративные конъюгативные элементы (ИСЭ) группы SXT/R391 в качестве средств для приобретения детерминант резистентности, стабильного поддержания и переноса на широкий спектр энтеробактериальных патогенов», в Микробные патогены и стратегии борьбы с ними: наука, технология и образование , изд. А. Мендес-Вилас (Бадахос: Исследовательский центр Formatex), 439–446.

Google Scholar

Армшоу П. и Пемброк Дж. Т. (2015). Исследование сенсибилизирующего клетки гена orf43 ICE R391 предполагает его роль в усилении переноса ICE в клетки-реципиенты. FEMS микробиол. лат. 362:fnu057 doi: 10.1093/femsle/fnu057

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Бибер, Дж. В., Буррус, В., Хоххут, Б., и Уолдор, М. К. (2002a). Сравнение SXT и R391, двух конъюгативных интегрирующих элементов: определение генетической основы для мобилизации детерминант резистентности. Сотовый. Мол. Жизнь наук. 59, 2065–2070. doi: 10.1007/s000180200006

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Бибер, Дж. В., Хоххут, Б., и Уолдор, М. К. (2002b). Геномный и функциональный анализ SXT, интегрирующего элемента переноса гена устойчивости к антибиотикам, полученного из Холерный вибрион . J. Бактериол. 184, 4259–4269. doi: 10.1128/JB.184.15.4259-4269.2002

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бибер, Дж. В., Хоххут, Б., и Уолдор, М. К. (2004). Реакция SOS способствует горизонтальному распространению генов устойчивости к антибиотикам. Природа 427, 72–74. doi: 10.1038/nature02241

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Бибер, Дж. В., и Уолдор, М. К. (2004). Идентификация операторов и промоторов, которые контролируют конъюгативный перенос SXT. J. Бактериол. 186, 5945–5949. doi: 10.1128/JB.186.17.5945-5949.2004

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Белланже, X., Морель, К., Декарис, Б., и Гедон, Г. (2008). Регуляция удаления интегративных и потенциально конъюгативных элементов из Streptococcus Thermophilus : роль репрессора arp1. Дж. Мол. микробиол. Биотехнолог. 14, 16–21. doi: 10.1159/000106078

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Белланже, X. , Пайо, С., Леблон-Бурже, Н., и Гедон, Г. (2014). Конъюгативные и мобилизуемые геномные острова у бактерий: эволюция и разнообразие. FEMS микробиол. Ред. 38, 720–760. doi: 10.1111/1574-6976.12058

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Bi, D., Xu, Z., Harrison, E.M., Tai, C., Wei, Y.Q., He, X.Y., et al. (2012). ICEberg: веб-ресурс для интегративных и конъюгативных элементов, найденных в Bacteria. Рез. нуклеиновых кислот. 40:D621–D626. doi: 10.1093/nar/gkr846

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Болтнер Д., МакМахон К., Пемброк Дж. Т., Страйк П. и Осборн А. М. (2002). R391: конъюгативная интегрирующая мозаика, состоящая из элементов фага, плазмиды и транспозона. J. Бактериол. 184, 5158–5169. doi: 10.1128/JB.184.18.5158-5169.2002

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Буррус В. и Уолдор М. К. (2004). Формирование бактериальных геномов с помощью интегративных и конъюгативных элементов. Рез. микробиол. 155, 376–386. doi: 10.1016/j.resmic.2004.01.012

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Чеккарелли Д., Спаньолетти М., Хасан Н. А., Лансинг С., Хук А. и Колвелл Р. Р. (2013). Новый интегративный конъюгативный элемент, обнаруженный в гаитянских изолятах Vibrio cholerae не-O1/не-O139. Рез. микробиол. 164, 891–893. doi: 10.1016/j.resmic.2013.08.004

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Guglielmini, J., Quintais, L., Garcillan-Barcia, M.P., de la Cruz, F., and Rocha, E.P. (2011). Репертуар ICE у прокариот подчеркивает единство, разнообразие и повсеместность конъюгации. Генетика PLoS. 7:e1002222. doi: 10.1371/journal.pgen.1002222

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Хоххут Б. и Уолдор М. К. (1999). Сайт-специфическая интеграция конъюгального элемента Vibrio cholerae SXT в prfC. Мол. микробиол. 32, 99–110. doi: 10.1046/j.1365-2958.1999.01330.x

CrossRef Full Text | Google Scholar

Хуиз-Рио С., Осорио С. Р., де Лоренцо В. и Лемос М. Л. (2005). Субтрактивная гибридизация выявила высокое генетическое разнообразие патогена рыб Photobacterium damselae subsp. Piscicida: свидетельство Sxt-подобного элемента. Микробиология 151, 2659–2669. doi: 10.1099/mic.0.27891-0

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Лей, К.-В., Чжан, А.-Ю., Ван, Х.-Н., Лю, Б.-Х., Ян, Л.-К., и Ян, Ю.-К. (2016). Характеристика интегративных и конъюгативных элементов SXT/R391 в изолятах Proteus mirabilis от сельскохозяйственных животных в Китае. Антимикроб. Агенты Чемотер. 60, 1935–1938 гг. doi: 10.1128/AAC.02852-15

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Льюис, Дж. А., и Хэтфул, Г. Ф. (2001). Контроль направленности рекомбинации, опосредованной интегразой: исследование факторов направленности рекомбинации (RDF), включая белки Xis и Cox. Рез. нуклеиновых кислот. 29, 2205–2216. doi: 10.1093/nar/29.11.2205

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

МакГрат Б.М., О’Халлоран Дж.А. и Пемброк Дж.Т. (2005). Предварительное воздействие УФ-облучения увеличивает частоту переноса конъюгативных транспозоноподобных элементов IncJ R391, R392, R705, R706, R997 и pMERPH и зависит от recA+. FEMS микробиол. лат. 243, 461–465. doi: 10.1016/j.femsle.2005.01.013

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

МакГрат, Б.М., О’Халлоран, Дж.А., Питерина, А., и Пемброк, Дж.Т. (2006). Молекулярные зонды для обнаружения элементов IncJ: семейство интегрирующихся мобильных генетических элементов, устойчивых к антибиотикам. J. Microbiol. Methods 66, 32–42 doi: 10.1016/j.mimet.2005.10.004

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

МакГрат, Б.М., и Пемброк, Дж.Т. (2004). Подробный анализ места вставки мобильных элементов R997, pMERPH, R392, R705 и R391 в E. coli K 12. FEMS Microbiol. лат. 237, 19–26. doi: 10.1111/j.1574-6968.2004.tb09673.x

Полный текст CrossRef | Google Scholar

Мишель Б. (2005). После 30 лет исследований бактериальная реакция SOS все еще удивляет нас. PLoS Биол. 3:e255. doi: 10.1371/journal.pbio.0030255

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Майкл Г. Б., Кадлец К., Суини М. Т., Бжушкевич Э., Лизеганг Х., Даниэль Р. и др. (2012). ICEPmu1, интегративный конъюгативный элемент (ICE) из Pasteurella multocida : структура и перенос. J. Антимикроб. Чемотер. 67, 91–100. doi: 10.1093/jac/dkr411

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

О’Халлоран, Дж. А., МакГрат, Б. М., и Пемброк, Дж. Т. (2007). Ген orf4 энтеробактериального ICE, R391, кодирует новый индуцируемый УФ-излучением фактор направленности рекомбинации, Jef, участвующий в вырезании и переносе ICE. FEMS микробиол. лат. 272, 99–105. дои: 10.1111/j.1574-6968.2007.00747.x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

О’Рейли, Э. К., и Кройцер, К. Н. (2004). Выделение SOS-конститутивных мутантов Escherichia coli . J. Бактериол. 186, 7149–7160. doi: 10.1128/JB.186.21.7149-7160.2004

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Пемброк Дж. Т., МакМахон К. и МакГрат Б. (2002). Роль конъюгативных транспозонов у Enterobacteriaceae. Сотовый. Мол. Жизнь наук. 59, 2055–2064 гг. doi: 10.1007/s000180200005

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пемброк Дж. Т. и Питерина А. В. (2006). Новый ICE в геноме Shewanella putrefaciens W3-18-1: сравнение с ICE-подобными элементами SXT/R391. FEMS микробиол. лат. 264, 80–88. doi: 10.1111/j.1574-6968.2006.00452.x

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Пемброк Дж. Т. и Стивенс Э. (1984). Эффект плазмиды R391 и другие плазмиды IncJ на выживаемость Escherichia coli после УФ-облучения. J. Gen. Microbiol. 130, 1839–1844 гг. doi: 10.1099/00221287-130-7-1839

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Пулен-Лапрад Д., Матто Д., Жак П. Э., Родриг С. и Буррус В. (2015). Активация переноса интегративных и конъюгативных элементов SXT/R391: распутывание регулона SetCD. Нуклеин. Кислоты рез. 43, 2045–2056. дои: 10.1093/nar/gkv071

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Ryan, MP, Pembroke, JT, and Adley, CC (2009). Новый элемент, подобный Tn4371-ICE, в Ralstonia pickettii и анализ генома для сравнительных элементов. ВМС микробиол. 9:242. doi: 10.1186/1471-2180-9-242

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Spagnoletti, M., Ceccarelli, D., Rieux, A., Fondi, M., Taviani, E., Fani, R., et al. (2014). Приобретение и развитие SXT-R391 интегративные конъюгативные элементы в линии седьмой пандемии Vibrio cholerae . МБио 5:e01356-14. doi: 10.1128/mBio.01356-14

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Сторрс, М. Дж., Пойарт-Салмерон, К., Триё-Куо, П., и Курвален, П. (1991). Конъюгативная транспозиция Tn916 требует эксцизивной и интегративной активности интегразы, кодируемой транспозоном. J. Бактериол. 173, 4347–4352.

Реферат PubMed | Академия Google

Тавиани, Э., Грим, С.Дж., Чун, Дж., Хук, А., и Колвелл, Р.Р. (2009). Геномный анализ нового интегративного конъюгативного элемента в Vibrio cholerae . ФЭБС Письмо. 583, 3630–3636 doi: 10.1016/j.febslet.2009.10.041

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Ван Худт, Р., Туссен, А., Райан, М. П., Пемброк, Дж. Т., Мергей, М., и Адли, К. С. (2012). «Семейство бактериальных мобильных генетических элементов Tn4371 ICE», в Bacterial Integrative Mobile Genetic Elements , редакторы А. П. Робертс и П. Маллани (Остин, Техас: Landes Bioscience).